Bufor cytrynianu sodu jest często stosowany do izolacji RNA, ponieważ minimalizuje on zasadową hydrolizę nici RNA, dzięki czemu jest nieoceniony do oczyszczania mRNA podczas genomowy badania i do studiowania transkrypcji. Bufory na bazie cytrynianów pomagają również w wykrywaniu antygenów w preparatach utrwalonych tkanek, ponieważ przerywają one połączenia krzyżowe utworzone między antygenami a ośrodkiem utrwalającym.
Wykonując następujące proste kroki, można utworzyć bufor cytrynianu sodu o pH 6 (kwaśny) w czasie poniżej 10 minut.
Materiały na bufor cytrynianu sodu
Do wytworzenia buforu cytrynianu sodu potrzeba niewiele materiałów. W przypadku kwasu cytrynowego potrzeba tylko 1 M wodorotlenku sodu, wody destylowanej i skalibrowanej sondy pH. Cytrynian sodu jest opcjonalny.
Wykonanie bufora wymaga również 1-litrowego cylindra miarowego, 1-litrowej kolby miarowej i trzech 1-litrowych butelek na media. Wreszcie będziesz potrzebować mieszadła magnetycznego i mieszadła magnetycznego. Wszystkie te materiały można znaleźć w szkole,
laboratoria w miejscu pracy lub zostać zakupione online lub w sklepach ze specjalistycznymi towarami.Dwie opcje wykonania bufora
Istnieją dwie metody tworzenia buforów cytrynianu sodu, w zależności od dostępnych materiałów.
- Jeśli masz zarówno kwas cytrynowy, jak i koniugatową bazę, utwórz roztwór podstawowy każdego z nich, mieszając 21 gramów kwasu cytrynowego w 1 litrze wody destylowanej i 29,4 g cytrynianu sodu w 1 litrze destylowanej wody woda.
- Jeśli masz pod ręką tylko kwas cytrynowy, wymieszaj 2,1 grama w nieco poniżej 1 litra wody destylowanej.
Mieszanie roztworów kwasu cytrynowego i cytrynianu sodu
Zmieszać 82 mililitry roztworu kwasu cytrynowego z 18 mililitrami roztworu cytrynianu sodu. Do tego dodaj wystarczającą ilość wody destylowanej, aby objętość mieszaniny spadła nieco poniżej 1 litra.
Regulacja pH
Delikatnie mieszając roztwór za pomocą mieszadła magnetycznego, użyj 1 M wodorotlenku sodu, aby doprowadzić pH mieszaniny do 6,0. Następnie za pomocą kolby miarowej dodaj więcej wody destylowanej, aby końcowa całkowita objętość roztworu osiągnęła dokładnie 1 litr.